ISRE-Luc/Raw264.7
CBP74098
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產(chǎn)品描述
產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫
| I. Background | |
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干擾素（IFN）是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的具有多種功能的可溶性糖蛋白，是先天和適應(yīng)性免疫的關(guān)鍵效應(yīng)分子。IFN 細(xì)胞因子根據(jù)其結(jié)合的不同干擾素受體分為三種類型：I 型、II 型和 III 型。Ⅰ型干擾素的分類較多，包括 IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-κ、IFN-ω、IFN-τ、IFN-ε、IFN-ξ 等；Ⅱ型干擾素為 IFN-γ；Ⅲ型干擾素即 IFN-λ，包括IFN-λ1、IFN-λ2 及 IFN-λ3。Ⅰ型干擾素主要功能是抗病毒及抗腫瘤，Ⅱ型干擾素主要功能是誘導(dǎo)主要組織相容性復(fù)合體（MHC）類抗原的表達(dá)和免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)，但其抗病毒作用比Ⅰ型干擾素弱。Ⅲ型 INF 為 2003 年發(fā)現(xiàn)的一種新型干擾素，具有廣譜的抗病毒及免疫調(diào)節(jié)活性。
配體結(jié)合后，I 型和 II 型受體均被激活，導(dǎo)致受體亞基二聚化和重排，從而通過自身磷酸化激活相關(guān) JAK，并進(jìn)一步激活 STAT 蛋白。磷酸化后，激活的 STAT 形成同型二聚體，然后轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核中，在那里啟動(dòng) IFN 刺激基因的轉(zhuǎn)錄。
I 型干擾素還可誘導(dǎo) ISGF3 復(fù)合物的形成，該復(fù)合物由 STAT1、STAT2 和 IRF9 組成。ISGF3 復(fù)合物與 ISRE（干擾素刺激反應(yīng)元件）結(jié)合，進(jìn)一步誘導(dǎo)啟動(dòng)子內(nèi)含有 ISRE 的干擾素刺激基因的轉(zhuǎn)錄。
IFNγ 與 IFNγ 受體結(jié)合導(dǎo)致下游 STAT1 在 Tyr701 位點(diǎn)發(fā)生酪氨酸磷酸化。產(chǎn)生磷酸化的 STAT1 同型二聚體轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核并與 GAS（IFNγ 激活位點(diǎn)）元件結(jié)合，從而誘導(dǎo) IFNγ 調(diào)控基因的表達(dá)。
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| II. Description | |
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ISRE-Luc RAW264.7 報(bào)告基因細(xì)胞是由 ISRE 調(diào)控并表達(dá) Luc 熒光素 酶報(bào)告基因的 RAW264.7細(xì)胞。RAW264.7 是小鼠巨噬細(xì)胞的常用模型，用于研究細(xì)胞對微 生物及其產(chǎn)物的反應(yīng)。RAW 264.7 衍生細(xì)胞內(nèi)源性表達(dá)許多 PRR，包括 toll 樣受體 （TLR）、 NOD 樣受體 （NLR）、RIG-I 樣受體 （RLR） 和 C 型凝集素受體 （CLR）。STING 激活的 原理見下圖所示。
 Figure 1：ISRE-Luc THP-1 細(xì)胞模型原理圖 |
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| III. Introduction | |
| Host Cell: | Raw264.7 |
| Expressed gene: | ISRE |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM+10%Heat Inactivated-FBS+200 μg/ml Zeocin++100 μg/ml Normocin |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| Application(s): | Functional(Report Gene) Assay |
| IV.. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Mus musculus, mouse |
| Tissue: | Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascites |
| Disease: | Abelson murine leukemia virus-induced tumor |
| Morphology: | Monocyte/macrophage |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
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Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001（we strongly suggest to purchase from Cobioer). Dose Response of 2'3-cGAMP in ISRE-Luc RAW264.7(C1). |
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